南京博研生物科技有限公司提供的小鼠高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA试剂盒的具体实验步骤如下：
：首先，将所有试剂和样本恢复至室温，确保标准品、质控品和样品做复孔以增加实验的可靠性 。
：从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0值孔、空白孔和样本孔，加入不同浓度的标准品、样本稀释液和待测样本 。
：弃去液体，每孔加入洗涤液洗板，重复5次。使用洗板机时，添加浸泡30秒的程序以提高检测精度 。
：除空白孔外，标准品孔、0值孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL 。
：揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20秒，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复5次 。
：将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光孵育15分钟 。
：所有孔加入终止液50μL，在450nm波长酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。
：以标准品浓度做为横坐标，对应的吸光度（OD值）作为纵坐标，利用计算机软件，采用四参数Logistic曲线-pl），创建标准曲线方程，通过样本的吸光度（OD值），利用方程计算样品的浓度值 。
以上步骤提供了南京博研生物小鼠HMGB-1 ELISA试剂盒的详细实验流程，以确保实验的准确性和可靠性。
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