在科研实验中,对人催产素(OT)浓度的精准检测至关重要。人催产素(OT)试剂盒(ELISA)为这一检测需求提供了有力工具,其可用于定量检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中人催产素(OT)的浓度。为确保实验的准确性与可靠性,使用该试剂盒时必须严格遵循相关说明。
:该试剂盒有 48T 和 96T 两种规格可供选择,以满足不同实验规模的需求。
:检测范围为 6.25→200 pg/mL,能够覆盖常见的人催产素(OT)浓度区间,为实验提供了较为广泛的适用范围。
:具有高度的特异性,结构类似物无交叉反应,且灵敏度高,小于 1.0 pg/mL,能够精准地检测出目标物质。
:在实验重复性方面表现出色,板内变异系数均小于 10%,板间变异系数均小于 15%,这保证了实验结果的稳定性和可靠性。
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗人催产素(OT)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,依次加入人催产素(OT)校准品和待测样本,接着加入另一株 HRP 标记的抗人催产素(OT)抗体(酶标抗体)。经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体的夹心复合物。之后加入底物 A 和 B,在 HRP 的催化下,底物产生蓝色产物,再在终止液(2M 硫酸)的作用下,最终转化为黄色。通过在酶标仪 450nm 波长上测定吸光度(OD 值),由于吸光度(OD 值)与待测样品中人催产素(OT)的浓度正相关,因此拟合校准品曲线,即可计算出样本中人催产素(OT)的浓度。
:需在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品禁止使用;同时,不能与其他厂家的试剂盒或者组分混用。
:使用试剂盒配套的样品稀释液;若样本值高于最高标准品浓度值,需将样本适当稀释后重新测定;此外,待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前务必排除该因素;通过其他方法得到的检测结果与本试剂盒测定结果不具有直接可比性。
:混合蛋白溶液时要避免起泡;加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应悬臂加样,防止交叉污染。
:合适的温育时间和充分的洗涤步骤是保证实验结果准确性的必要条件。使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可提高检测精度。
:底物溶液正常为无色液体,若保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不可使用;终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物会瞬间变为黄色。
:实验中用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存;所有液体组分,使用前需充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
进行实验时,需要准备一系列仪器和用品,包括酶标仪(450nm)、精密移液器及一次性吸头、蒸馏水、洗瓶或者自动洗板机、37℃水浴锅或恒温箱以及 500ml 量筒等。
:试剂盒包含校准品、包被微孔板、HRP 标记抗体、样本稀释液、底物液 A、底物液 B、终止液、20× 浓缩洗涤液、说明书、自封袋和不干胶等组分。校准品浓度依次为 200、100、50、25、12.5、6.25 pg/mL。
:未开封的试剂盒需保存在 2 - 8℃,不得使用过期试剂盒。不同组分开封后有不同的储存期限和条件,如校准品开封后在 2 - 8℃可保存 14 天,包被微孔板开封后在 2 - 8℃可保存 14 天等。同时需注意,如果试剂盒的组份需要再次使用,要确保上一次使用之后没有被污染;酶标板单次未使用完,要密封放到 2 - 8℃保存。
人催产素(OT)试剂盒(ELISA)为科研人员提供了一个可靠的检测人催产素(OT)浓度的工具。严格按照说明书进行操作,不仅能保证实验结果的准确性和可靠性,还能最大程度地发挥试剂盒的性能,助力科研工作的顺利开展。
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